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Qwerty999新蟲 (初入文壇)
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[求助]
阿米巴全基因組DNA提取 已有2人參與
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各位老師, 最近在做阿米巴全基因組DNA提取,試過酚-氯仿法、過柱子的試劑盒、磁珠的試劑盒,效果都不好,有拖尾,送公司質(zhì)檢也總是報告“DNA嚴重降解”,后來加了RNA酶室溫5min,小片段拖尾少了,但是如果同樣RNA酶水浴37℃ 1h就會發(fā)現(xiàn)我認為的DNA條帶也不見了!這是為什么啊,難道DNA直接沒有提取出來嗎?我還按照文獻上液氮凍融、研磨的方式進行了提取,發(fā)現(xiàn)只要液氮一處理,電泳條帶更糟糕。 今天聯(lián)系公司,想讓公司幫忙提取一次,公司說阿米巴有傳染性不給提取,只能自己做,也不收取回收的膠塊,我已經(jīng)做了一個月了,一點進展都沒有 ,謝謝各位老師解答疑惑@biostar2009 |
金蟲 (著名寫手)
| 問了我們研發(fā)同事,從你的描述初步判斷可能是以下原因:1、即便室溫條件下,DNA也會降解,你這水域時間過長,導致DNA降解;2、目前市場上有多種RNA酶,不知道你用的是哪一種?某些RNA酶不是特異性消化RNA,也會消化DNA;3、可能DNA提取效果比較差;建議和我們的技術(shù)進行溝通,上海領(lǐng)駿生物科技有限公司,www.lnjnbio.com;也可以用我們的磁珠法動物組織DNA提取試劑盒試試; |
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