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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 畢赤酵母好難
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烏克蘭跑男銅蟲 (正式寫手)
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[交流]
畢赤酵母好難 已有5人參與
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對于會者來說不難，但是我沒有成功表達過畢赤酵母可太難了。 轉(zhuǎn)化后第五天才在md上出現(xiàn)轉(zhuǎn)化子，形態(tài)特征和酵母一樣。欣喜的去用遺傳霉素篩選，也得到了菌落隨著梯度減少的結(jié)果。PCR怎么都p不出來，沒有2200這條酵母自身的帶，但是有一條1900的帶（算上AOX基因加上我的目的基因正好）；就順著往下一步用目的基因引物驗證了，又P不出來，唉。。:-( 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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轉(zhuǎn)化成功后這個菌就可以利用組氨酸了呀… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2022-08-09 14:31:13
烏克蘭跑男
銅蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 水產(chǎn)生物免疫學與病害控制
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我用的GS115 PPIC9K載體 sal.1單酶切 前邊都沒問題，轉(zhuǎn)化后甚至連感受態(tài)涂md板都會有菌落，不是組氨酸缺陷的么，怎么會長呢？感覺和invitrogen的手冊不是一個路數(shù)，來個大佬帶帶弟弟吧 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2022-08-08 22:58:26
烏克蘭跑男
銅蟲 (正式寫手)
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送紅花一朵 |
沒轉(zhuǎn)化的感受態(tài)涂布也長了，MD都按著配方配的 這個解釋不了，長出來的菌p后是假陽性。 能和您交流下轉(zhuǎn)化流程嗎，我的轉(zhuǎn)化總是不成功。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2022-08-09 16:08:32
 本帖僅樓主可見 |
5樓2022-08-10 20:33:11
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