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稻草人2011鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
大腸桿菌表達載體拷貝數(shù)問題
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大家好，最近在做大腸桿菌的表達優(yōu)化，因為目標蛋白的折疊速率低，所以想優(yōu)化載體的拷貝數(shù)。 目前所用表達載體的origin有兩個，一個是f1 origin，一個是ColE1 pBR322 origin。在文獻上看ORI為ColE1 的拷貝數(shù)大概為40，請問1. 如果要換成更低拷貝數(shù)的ORI, 比如pSC101，需要更換表達載體和宿主嗎?目前的宿主是BL21 （DE3）. 2. 如果不需要換表達載體和宿主，可以直接用新的ORI堿基序列替換掉原先的ORI序列嗎？3. 載體上的ORI具體是哪一段可以用什么軟件分析出來呢？ 萬分感謝！ |
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