| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 978 | 回復(fù): 2 | ||
| 【懸賞金幣】回答本帖問(wèn)題,作者云之遙V將贈(zèng)送您 6 個(gè)金幣 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖,點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
云之遙V新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
畢赤酵母pGAPZαA轉(zhuǎn)化染菌問(wèn)題 已有1人參與
|
|
|
求助畢赤酵母轉(zhuǎn)化過(guò)程中的問(wèn)題,使用的是pGAPZαA質(zhì)粒,Zeocin濃度100ug/ml,感受態(tài)使用山梨醇處理制備而成,現(xiàn)做現(xiàn)用,轉(zhuǎn)化后對(duì)照平板總是長(zhǎng)菌,不知道原因,師姐就沒(méi)遇到過(guò)類(lèi)似問(wèn)題,本人懷疑可能有以下幾個(gè)可能原因: 1.抗生素濃度不夠,但師姐同樣的質(zhì)粒50ug/ml都沒(méi)出現(xiàn)過(guò)這種問(wèn)題。! 2.電轉(zhuǎn)時(shí)加菌液過(guò)多,自己加了200ul,文獻(xiàn)都是100ul,導(dǎo)致 轉(zhuǎn)化效率不夠,但為什么會(huì)長(zhǎng)菌呢? 3.離心涂布時(shí)留菌液太多,留100ul和200ul,我都試過(guò),100ul涂布比較干,200ul比較濕潤(rùn),難道這也影響? 4.100ml菌液,od1.3左右,感受態(tài)制備4,5管,難道說(shuō)菌太多抗生素?zé)o法抑制?之前做過(guò)分裝10管的話對(duì)照不會(huì)長(zhǎng)菌,但會(huì)不會(huì)影響轉(zhuǎn)化效率,而且別人正常分裝4,5管也沒(méi)事呀,哭了。。。 求助大神幫忙解決,很平常的轉(zhuǎn)化一直困擾我很久了。 ![]() |
新蟲(chóng) (小有名氣)
|
一些建議: 1.轉(zhuǎn)化用菌株驗(yàn)證一下,是不是染菌了,自帶了zeocin抗性 2. 電轉(zhuǎn)杯污染,重新處理電轉(zhuǎn)杯,重新轉(zhuǎn)化。(電轉(zhuǎn)過(guò)程,比如菌液分裝量,涂布之類(lèi)的,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一般不會(huì)有太大的影響的) 祝好! 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 我嘗試在小木蟲(chóng)上招計(jì)算機(jī)專(zhuān)業(yè)的調(diào)劑學(xué)生 +3 | littlehu66 2026-03-04 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 初試297求調(diào)劑 +3 | 一個(gè)蘿蘿 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +6 | cgyzqwn 2026-03-01 | 13/650 |
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 大爆炸難民 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +6 | Trying] 2026-03-05 | 8/400 |
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +6 | vuzhdkfjkx 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
[考研] 材料085601一志愿哈工大317 +4 | 壓迫感行 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
[考研] 歡迎采礦、地質(zhì)、巖土、計(jì)算機(jī)、人工智能等專(zhuān)業(yè)的同學(xué)報(bào)考 +10 | pin8023 2026-02-28 | 13/650 |
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)312分求調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
[考研] 化學(xué)工程求調(diào)劑 +10 | 化工人999 2026-03-04 | 10/500 |
|
|
[考研] 331求調(diào)劑 +3 | zzZ&zZ 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +8 | yang婷 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +8 | 路lyh123 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +3 | 少71.8 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
[考研] 化學(xué),材料,環(huán)境類(lèi)求調(diào)劑 +7 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
[考研] 材料工程274求調(diào)劑 +5 | Lilithan 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
[基金申請(qǐng)] 此成果不能導(dǎo)入原因:元數(shù)據(jù)必填信息不完整,可 進(jìn)行補(bǔ)充。 +4 | Kittylucky 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
[考研] 1 +5 | 2026計(jì)算機(jī)_誠(chéng)心 2026-03-01 | 8/400 |
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +6 | 愛(ài)擦汗的可樂(lè)冰 2026-02-28 | 7/350 |
|