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枯藤小瞧了新蟲 (初入文壇)
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[求助]
引物二聚體問題 已有1人參與
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我做的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化后的PCR,之前用這對(duì)引物跑出來的結(jié)果很好,沒有引物二聚體的情況發(fā)生,而且退火溫度也已經(jīng)摸索好,但是后來再做(樣本換了一批),跑膠發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物條帶很暗,而引物二聚體條帶很亮,我又把之前跑的好的樣本重跑了一下,發(fā)現(xiàn)也是引物二聚體嚴(yán)重,很奇怪不知道為什么。重配引物、改變退火溫度、改變循環(huán)數(shù)我都試了,還是這樣,真的是引物不行嗎?那為什么開始做的時(shí)候沒出現(xiàn)這種情況啊 求助科研大佬們解答!不勝感激! |
鐵蟲 (正式寫手)
金蟲 (小有名氣)
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