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枯藤小瞧了新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
引物二聚體問(wèn)題 已有1人參與
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我做的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化后的PCR,之前用這對(duì)引物跑出來(lái)的結(jié)果很好,沒(méi)有引物二聚體的情況發(fā)生,而且退火溫度也已經(jīng)摸索好,但是后來(lái)再做(樣本換了一批),跑膠發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物條帶很暗,而引物二聚體條帶很亮,我又把之前跑的好的樣本重跑了一下,發(fā)現(xiàn)也是引物二聚體嚴(yán)重,很奇怪不知道為什么。重配引物、改變退火溫度、改變循環(huán)數(shù)我都試了,還是這樣,真的是引物不行嗎?那為什么開(kāi)始做的時(shí)候沒(méi)出現(xiàn)這種情況啊 求助科研大佬們解答!不勝感激!! |
鐵蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
金蟲(chóng) (小有名氣)
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