 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 634 | 回復: 0 | ||||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者半調子梅花將贈送您 5 個金幣 | ||||
半調子梅花鐵蟲 (初入文壇)
|
[求助]
關于噬菌體展示抗體篩選過程中抗體序列缺失的問題。
|
|||
|
請教各位大神： 本人從事納米抗體研發(fā)工作，主要運用噬菌體展示技術結合固相篩選法篩選納米抗體，我們構建了一個天然庫，在篩靶點的過程中單克隆phage-ELISA顯示陽性，然后對該克隆進行菌落PCR，發(fā)現(xiàn)條帶明顯比預期短了很多，理論應該是600bp的條帶，卻只有500bp或者250bp，對這個500bp和250bp片段進行測序發(fā)現(xiàn)不是空載，能夠找到正反引物，經(jīng)過比對，這些片段是不完整的抗體序列，其中500bp的條帶有大片段缺失CDR3序列和部分FR序列，而250bp則缺失更多，實際抗體序列只剩下一百多bp，幾乎缺失所有CDR序列和部分FR序列。在建庫的時候我們檢測過庫的陽性率，基本上都是對的序列，幾十個樣本PCR都沒有這種序列，而經(jīng)過誘導噬菌體（輔助噬菌體為M13K07）后就有了，而且在篩選中大量富集，特異性還很高（不跟milk結合）。這個問題很困擾我。哪位大神知道原因和原理，有什么辦法解決。  |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 噬菌體展示 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有163人回復
-
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 半調子梅花 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調劑 +3 | 邱gl 2026-03-11 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 接受26屆調劑生 +22 | 豬豬豬毛 2026-03-06 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 0857 資源與環(huán)境 285分 +5 | 未名考生 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料專碩288分求調劑 一志愿211 +3 | 在家想你 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調劑 +5 | 調劑的考研學生 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 313分生物學求調劑 +5 | Yyt楊1 2026-03-09 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工353分求調劑 +11 | NIFFFfff 2026-03-09 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩調劑自薦信，初試323 +6 | 李白26 2026-03-07 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調劑！ +3 | 朔朔話 2026-03-09 | 3/150 |
|
|
|
[考研] A區(qū)一本交叉課題組，低分調劑，招收機械電子信息通信等交叉方向 +56 | lisimayy 2026-03-04 | 73/3650 |
|
|
|
[考博] 求材料讀博院校 +9 | yanglei131 2026-03-08 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0817化學工程319求調劑 +7 | lv945 2026-03-08 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 310 070300化學求調劑 +4 | 撲風鈴的貓 2026-03-08 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703求調劑 +10 | c297914 2026-03-06 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 334求調劑 +5 | Trying] 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0817找調劑 +6 | kk扛 2026-03-08 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調劑，一志愿華中科大0702，數(shù)一英一，293 +4 | 小羅露一二 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 2026年博士名額撿漏 +4 | 科研ya 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 268求調劑 +4 | 劉合華 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 316求調劑 +3 | 林小星發(fā)大財 2026-03-05 | 5/250 |
|