 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 631 | 回復(fù): 0 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者半調(diào)子梅花將贈送您 5 個金幣 | |||
半調(diào)子梅花鐵蟲 (初入文壇)
|
[求助]
關(guān)于噬菌體展示抗體篩選過程中抗體序列缺失的問題。
|
||
|
請教各位大神： 本人從事納米抗體研發(fā)工作，主要運用噬菌體展示技術(shù)結(jié)合固相篩選法篩選納米抗體，我們構(gòu)建了一個天然庫，在篩靶點的過程中單克隆phage-ELISA顯示陽性，然后對該克隆進行菌落PCR，發(fā)現(xiàn)條帶明顯比預(yù)期短了很多，理論應(yīng)該是600bp的條帶，卻只有500bp或者250bp，對這個500bp和250bp片段進行測序發(fā)現(xiàn)不是空載，能夠找到正反引物，經(jīng)過比對，這些片段是不完整的抗體序列，其中500bp的條帶有大片段缺失CDR3序列和部分FR序列，而250bp則缺失更多，實際抗體序列只剩下一百多bp，幾乎缺失所有CDR序列和部分FR序列。在建庫的時候我們檢測過庫的陽性率，基本上都是對的序列，幾十個樣本PCR都沒有這種序列，而經(jīng)過誘導(dǎo)噬菌體（輔助噬菌體為M13K07）后就有了，而且在篩選中大量富集，特異性還很高（不跟milk結(jié)合）。這個問題很困擾我。哪位大神知道原因和原理，有什么辦法解決。  |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 噬菌體展示 |
» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測的實際應(yīng)用案例
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有117人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 半調(diào)子梅花 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿南京大學(xué)資源與環(huán)境專業(yè)283分求調(diào)劑 +3 | 追云?? 2026-03-04 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料085601一志愿哈工大317 +3 | 壓迫感行 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 曼殊2266 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境調(diào)劑 +7 | 柒槿levana 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 320材料與化工，求調(diào)劑 +6 | 鶴遨予卿 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿中石油，化學(xué)工程，301求調(diào)劑 +3 | 豚饅枳枳 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 主題 +3 | realstar2006 2026-02-27 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請] 請問大家，研究風(fēng)險與應(yīng)對措施那里， 大家都怎么寫呢 ？ +3 | cauasen 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 338求調(diào)劑 +5 | 18162027187 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 261求調(diào)劑 +3 | 陸lh 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿東北大學(xué)材料專碩328，求調(diào)劑 +3 | shs1083 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +3 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265分求調(diào)劑不調(diào)專業(yè)和學(xué)校有行學(xué)上就 +6 | 禮堂丁真258 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +8 | 19171856320 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[基金申請] 此成果不能導(dǎo)入原因：元數(shù)據(jù)必填信息不完整，可 進行補充。 +4 | Kittylucky 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)調(diào)劑 +10 | 提神豆沙包 2026-02-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 295復(fù)試調(diào)劑 +3 | 簡木ChuFront 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[論文投稿]
Optics letters投稿被拒求助
 30+3
|
luckyry 2026-02-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +4 | 73372112 2026-02-28 | 6/300 |
|