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酵母信號肽分泌實驗 已有1人參與
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請求實驗大佬指導,我最近在做蛋白的信號肽分泌活性的試驗。我研究的蛋白經(jīng)signalP預測有信號肽,大概17個aa序列,然后我連接到PSUC2的載體上轉(zhuǎn)化到酵母感受態(tài)YTK12當中,但是轉(zhuǎn)化后將SD-trp培養(yǎng)基上生長的菌落挑到Y(jié)PRAA培養(yǎng)基上面的時候劃線沒有菌落長出來,就連陽性對照avr1b都沒長,相反酵母菌株YTK12長出來了,我分析了一下會不會是培養(yǎng)基的問題,首先棉子糖的種類是不是有區(qū)別,還有就是加的抗霉素A的濃度,但是我們重新做了一批培養(yǎng)基,還是沒有長出來,實在是不知道哪里出了問題,還請大佬指導一下。還有就是我選擇信號肽長度的時候,并沒有按照信號肽預測軟件的17個aa所對應的長度,我選了90bp的長度。會不會是這個的問題呢? @biostar2009 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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