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拇指大姑娘新蟲 (初入文壇)
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[求助]
酵母信號(hào)肽分泌實(shí)驗(yàn) 已有1人參與
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請(qǐng)求實(shí)驗(yàn)大佬指導(dǎo)，我最近在做蛋白的信號(hào)肽分泌活性的試驗(yàn)。我研究的蛋白經(jīng)signalP預(yù)測(cè)有信號(hào)肽，大概17個(gè)aa序列，然后我連接到PSUC2的載體上轉(zhuǎn)化到酵母感受態(tài)YTK12當(dāng)中，但是轉(zhuǎn)化后將SD-trp培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落挑到Y(jié)PRAA培養(yǎng)基上面的時(shí)候劃線沒有菌落長(zhǎng)出來(lái)，就連陽(yáng)性對(duì)照avr1b都沒長(zhǎng)，相反酵母菌株YTK12長(zhǎng)出來(lái)了，我分析了一下會(huì)不會(huì)是培養(yǎng)基的問題，首先棉子糖的種類是不是有區(qū)別，還有就是加的抗霉素A的濃度，但是我們重新做了一批培養(yǎng)基，還是沒有長(zhǎng)出來(lái)，實(shí)在是不知道哪里出了問題，還請(qǐng)大佬指導(dǎo)一下。還有就是我選擇信號(hào)肽長(zhǎng)度的時(shí)候，并沒有按照信號(hào)肽預(yù)測(cè)軟件的17個(gè)aa所對(duì)應(yīng)的長(zhǎng)度，我選了90bp的長(zhǎng)度。會(huì)不會(huì)是這個(gè)的問題呢？ @biostar2009 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2021-11-23 18:28:08
3樓2021-12-17 09:26:54
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