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有沒有大佬做過FM4-64染料染色的?為何我用了很低的劑量胞內(nèi)全被染上色了 已有1人參與
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| RT,我用文獻(xiàn)推薦的劑量,甚至稀釋了很多倍,染色效果依然不好,胞內(nèi)全被染上色了 |
木蟲 (正式寫手)
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這個染料和DIO/DID這些染料的染色都是非常迅速的,所以濃度不是最關(guān)鍵的問題,染色時間才是! 我看你是用甲醛固定了。固定過的細(xì)胞通透性一般增加,染料更容易進(jìn)入細(xì)胞造成胞內(nèi)染色,因為胞內(nèi)一樣很多膜結(jié)構(gòu)或者脂類物質(zhì)。 建議就是染色最長時間不超過2分鐘!甚至你可以嘗試1分鐘或者更短的時間, 還有重要的一點就是第一遍洗要迅速,不能洗好幾分鐘,因為這時候低濃度的染料殘留依然會繼續(xù)持續(xù)染色。 |
木蟲 (正式寫手)
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