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Siw新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
EMSA驗(yàn)證-蛋白與探針結(jié)合條帶彌散 已有1人參與
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大家好,我最近做一個(gè)調(diào)控子與基因啟動(dòng)子之間的相互作用,EMSA驗(yàn)證。現(xiàn)在純化了蛋白,與熒光標(biāo)記探針作用,通過(guò)提高蛋白濃度發(fā)現(xiàn)其與基因有結(jié)合,但結(jié)合條帶非常彌散,有沒(méi)有能幫我看看怎么回事?我已經(jīng)優(yōu)化了binding 條件,但是條帶還是彌散。蛋白是加入了ul,不是ml。且蛋白濃度是2.1mg/ml。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
專(zhuān)家顧問(wèn) (正式寫(xiě)手)
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +21 |

新蟲(chóng) (小有名氣)
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你好,請(qǐng)問(wèn)你解決你的問(wèn)題了嗎,我最近也在做這個(gè),但是我加了蛋白的組連條帶都沒(méi)有,用的6%的非變性膠,1×tbe,我的蛋白pi是5.7,是不是因?yàn)榈鞍妆豢ㄖ髁耍懿怀鰜?lái),還是有其他的什么問(wèn)題 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
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請(qǐng)問(wèn),我的蛋白pi是5.7,做emsa,用的1×tbe,緩沖液,跑完后,只有沒(méi)有加蛋白的有條帶,加蛋白的沒(méi)有條帶,或者是彌散的條帶(很不清楚),這個(gè)是因?yàn)槲揖彌_液PH的問(wèn)題嗎,但我又看網(wǎng)上說(shuō),不需要考慮蛋白pi,是的嗎? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
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