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Siw新蟲 (初入文壇)
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[求助]
EMSA驗(yàn)證-蛋白與探針結(jié)合條帶彌散 已有1人參與
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大家好，我最近做一個(gè)調(diào)控子與基因啟動(dòng)子之間的相互作用，EMSA驗(yàn)證�，F(xiàn)在純化了蛋白，與熒光標(biāo)記探針作用，通過提高蛋白濃度發(fā)現(xiàn)其與基因有結(jié)合，但結(jié)合條帶非常彌散，有沒有能幫我看看怎么回事?我已經(jīng)優(yōu)化了binding 條件，但是條帶還是彌散。蛋白是加入了ul，不是ml。且蛋白濃度是2.1mg/ml。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2021-10-21 15:15:09
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3樓2021-10-21 16:47:00
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你好，請(qǐng)問你解決你的問題了嗎，我最近也在做這個(gè)，但是我加了蛋白的組連條帶都沒有，用的6%的非變性膠，1×tbe，我的蛋白pi是5.7，是不是因?yàn)榈鞍妆豢ㄖ髁�，跑不出來，還是有其他的什么問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2022-03-08 22:15:21
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請(qǐng)問，我的蛋白pi是5.7，做emsa，用的1×tbe，緩沖液，跑完后，只有沒有加蛋白的有條帶，加蛋白的沒有條帶，或者是彌散的條帶（很不清楚），這個(gè)是因?yàn)槲揖彌_液PH的問題嗎，但我又看網(wǎng)上說，不需要考慮蛋白pi，是的嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2022-03-08 22:18:21
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6樓2022-03-13 02:32:49
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