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myxmyhh銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化過程中破碎原因求助
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水稻黃化苗制備原生質(zhì)體成功后,加入質(zhì);靹蜱R檢沒問題。 在加入40%PEG4000后,輕柔混勻時在管子中形成大塊類似于藻類的綠色不溶物沉淀,鏡檢發(fā)現(xiàn)原生質(zhì)體破碎 破碎的碎片黏在一起形成了上述沉淀,但實驗過程中使用的試劑都是課題組用過不存在問題的,且PEG的濃度也對。 求助各位可能是什么問題造成的原生質(zhì)體破碎。 本次實驗跟之前的區(qū)別在于,這次使用了很多材料。 實驗過程中,原生質(zhì)體和雜質(zhì)都比較多,使用W5 buffer清洗一次后,在管中殘留200μl左右W5 buffer時加入1mL MMG溶液重懸細胞。 想請問大家是否體系中雜質(zhì)太多也會導致加入PEG后細胞破碎?這是現(xiàn)在我能想到最有可能的原因。 |
新蟲 (小有名氣)
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