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myxmyhh銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化過程中破碎原因求助
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水稻黃化苗制備原生質(zhì)體成功后，加入質(zhì)�；靹蜱R檢沒問題。 在加入40%PEG4000后，輕柔混勻時(shí)在管子中形成大塊類似于藻類的綠色不溶物沉淀，鏡檢發(fā)現(xiàn)原生質(zhì)體破碎 破碎的碎片黏在一起形成了上述沉淀，但實(shí)驗(yàn)過程中使用的試劑都是課題組用過不存在問題的，且PEG的濃度也對。 求助各位可能是什么問題造成的原生質(zhì)體破碎。 本次實(shí)驗(yàn)跟之前的區(qū)別在于，這次使用了很多材料。 實(shí)驗(yàn)過程中，原生質(zhì)體和雜質(zhì)都比較多，使用W5 buffer清洗一次后，在管中殘留200μl左右W5 buffer時(shí)加入1mL MMG溶液重懸細(xì)胞。 想請問大家是否體系中雜質(zhì)太多也會導(dǎo)致加入PEG后細(xì)胞破碎？這是現(xiàn)在我能想到最有可能的原因。 |
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