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王振操新蟲 (小有名氣)
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[求助]
體外用DCFH測ROS的生成
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體外測光敏劑的ROS的生成。在0s的時候有個I0，比較多種光敏劑的生成ROS的速率的時候用I/I0作點線圖。但是各種光敏劑在0s的時候可能會增加I0的熒光強度，導(dǎo)致各自I0不同，這時候到最后即使DCFH完全反應(yīng)完I一樣，但是I比I0不一樣。請問這時候怎么處理。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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王振操(wolfghost代發(fā)): 金幣+10, 有效應(yīng)助獎勵~ 2021-03-14 22:34:50
wolfghost: 博學(xué)EPI+1 2021-03-14 22:34:55
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wolfghost: 博學(xué)EPI+1 2021-03-14 22:34:55
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DCFH測活性氧的原理是因為其本身沒有熒光，但是被氧化后變成有熒光的分子。所以你孵育時間足夠長的話看，最終所有的DCFH終歸會變成有熒光的分子。 如果想測ROS的釋放速率，那么最好實驗的前提假設(shè)是每組所使用的DCFH是大過量的且等量的，這時候可以近似處理為一個一級反應(yīng)（pseudo-first order reaction），也就是熒光的生成速率只取決于ROS的含量。 具體來說，樓主最好的方法是用deltaI/(Imax - I0) vs 時間做圖,只算初始一小段時間的斜率，即計算熒光強度的增速。其中deltaI為某個時間點熒光強度的增量，Imax為最終熒光強度，I0為初始熒光強度 |
2樓2021-01-25 14:44:20
王振操
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3樓2021-01-25 21:03:55
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4樓2025-08-18 14:02:46
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