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王振操新蟲 (小有名氣)
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[求助]
體外用DCFH測ROS的生成
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體外測光敏劑的ROS的生成。在0s的時候有個I0,比較多種光敏劑的生成ROS的速率的時候用I/I0作點線圖。但是各種光敏劑在0s的時候可能會增加I0的熒光強度,導致各自I0不同,這時候到最后即使DCFH完全反應完I一樣,但是I比I0不一樣。請問這時候怎么處理。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
版主 (著名寫手)
己所不欲,勿施于人
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DCFH測活性氧的原理是因為其本身沒有熒光,但是被氧化后變成有熒光的分子。所以你孵育時間足夠長的話看,最終所有的DCFH終歸會變成有熒光的分子。 如果想測ROS的釋放速率,那么最好實驗的前提假設是每組所使用的DCFH是大過量的且等量的,這時候可以近似處理為一個一級反應(pseudo-first order reaction),也就是熒光的生成速率只取決于ROS的含量。 具體來說,樓主最好的方法是用deltaI/(Imax - I0) vs 時間做圖,只算初始一小段時間的斜率,即計算熒光強度的增速。其中deltaI為某個時間點熒光強度的增量,Imax為最終熒光強度,I0為初始熒光強度 |

新蟲 (小有名氣)

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