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[交流]
用cDNA擴(kuò)增一個(gè)基因，總是擴(kuò)增出帶有內(nèi)含子的片段
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各位蟲友，我要擴(kuò)增一個(gè)基因的cDNA序列，擴(kuò)增出來的片段總是帶有內(nèi)含子的。因?yàn)橹白鲞^RACE，知道序列是怎么樣的。要擴(kuò)增基因全長(zhǎng)的時(shí)候總是擴(kuò)增出帶有內(nèi)含子的片段。多次提了RNA，并且這些cDNA我也用來擴(kuò)增其他的基因，十幾個(gè)基因都沒有問題，跑膠也沒有看到DNA的條帶，單單這一個(gè)基因擴(kuò)增出來的片段不對(duì)。 請(qǐng)問有沒有什么好辦法，原因是什么？ |
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leannele3樓2020-11-18 16:38:49
fuyuandj86
版主 (著名寫手)
己所不欲，勿施于人
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
leannele: 金幣+10 2020-11-19 22:59:44
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
leannele: 金幣+10 2020-11-19 22:59:44
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可能這個(gè)基因的某一個(gè)亞型就是帶有這個(gè)內(nèi)含子片段。換句話說，在某種細(xì)胞中可能這個(gè)內(nèi)含子不被識(shí)別出來，存在一個(gè)帶有它的剪切拼接亞型。如果一定要p出來和數(shù)據(jù)庫(kù)一樣的序列，要么就換個(gè)細(xì)胞要么就基因合成，現(xiàn)在基因合成也不算貴。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://gaoyang168.com/3g ] |
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2樓2020-11-18 11:30:49
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