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| 【有獎(jiǎng)交流】積極回復(fù)本帖子，參與交流，就有機(jī)會(huì)分得作者 leannele 的 80 個(gè)金幣 | |||
[交流]
用cDNA擴(kuò)增一個(gè)基因，總是擴(kuò)增出帶有內(nèi)含子的片段
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各位蟲(chóng)友，我要擴(kuò)增一個(gè)基因的cDNA序列，擴(kuò)增出來(lái)的片段總是帶有內(nèi)含子的。因?yàn)橹白鲞^(guò)RACE，知道序列是怎么樣的。要擴(kuò)增基因全長(zhǎng)的時(shí)候總是擴(kuò)增出帶有內(nèi)含子的片段。多次提了RNA，并且這些cDNA我也用來(lái)擴(kuò)增其他的基因，十幾個(gè)基因都沒(méi)有問(wèn)題，跑膠也沒(méi)有看到DNA的條帶，單單這一個(gè)基因擴(kuò)增出來(lái)的片段不對(duì)。 請(qǐng)問(wèn)有沒(méi)有什么好辦法，原因是什么？ |
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fuyuandj86
版主 (著名寫手)
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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
leannele: 金幣+10 2020-11-19 22:59:44
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
leannele: 金幣+10 2020-11-19 22:59:44
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可能這個(gè)基因的某一個(gè)亞型就是帶有這個(gè)內(nèi)含子片段。換句話說(shuō)，在某種細(xì)胞中可能這個(gè)內(nèi)含子不被識(shí)別出來(lái)，存在一個(gè)帶有它的剪切拼接亞型。如果一定要p出來(lái)和數(shù)據(jù)庫(kù)一樣的序列，要么就換個(gè)細(xì)胞要么就基因合成，現(xiàn)在基因合成也不算貴。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://gaoyang168.com/3g ] |
leannele
2樓2020-11-18 11:30:49
3樓2020-11-18 16:38:49
4樓2020-11-19 23:00:25
5樓2020-11-19 23:01:11
6樓2020-11-19 23:01:17
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