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求指教，含有SacB基因的大腸桿菌在10%蔗糖平板可正常生長(zhǎng)是什么原因？ 已有2人參與
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表達(dá)SacB基因的載體構(gòu)建成功之后（已測(cè)序驗(yàn)證），將含有該載體的大腸桿菌DH5α涂布至含有10%蔗糖的LB平板，發(fā)現(xiàn)可以正常生長(zhǎng)，文獻(xiàn)報(bào)道含有SacB基因的大腸桿菌在蔗糖濃度為5%或10%就不能生長(zhǎng)了。 那可能的原因: 1.表達(dá)SacB的啟動(dòng)子太弱，SacB表達(dá)量不夠？ 2.含有10%蔗糖的LB固體培養(yǎng)基配置有問題？我是把LB固體培養(yǎng)基（121℃，20min）和蔗糖(115℃，30min)分開滅菌，倒平板之前混勻加的卡那。 3.大腸桿菌DH5α不適合用于蛋白表達(dá)？作為克隆菌株，DH5α的蛋白表達(dá)量雖然低，但是也能使蛋白正常表達(dá)吧，我用同樣的啟動(dòng)子在DH5α表達(dá)LacZ基因（3075 bp）都成功了。 有做過相關(guān)實(shí)驗(yàn)的老師同學(xué)還請(qǐng)多多指教 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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