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求指教,含有SacB基因的大腸桿菌在10%蔗糖平板可正常生長是什么原因? 已有2人參與
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表達SacB基因的載體構(gòu)建成功之后(已測序驗證),將含有該載體的大腸桿菌DH5α涂布至含有10%蔗糖的LB平板,發(fā)現(xiàn)可以正常生長,文獻報道含有SacB基因的大腸桿菌在蔗糖濃度為5%或10%就不能生長了。 那可能的原因: 1.表達SacB的啟動子太弱,SacB表達量不夠? 2.含有10%蔗糖的LB固體培養(yǎng)基配置有問題?我是把LB固體培養(yǎng)基(121℃,20min)和蔗糖(115℃,30min)分開滅菌,倒平板之前混勻加的卡那。 3.大腸桿菌DH5α不適合用于蛋白表達?作為克隆菌株,DH5α的蛋白表達量雖然低,但是也能使蛋白正常表達吧,我用同樣的啟動子在DH5α表達LacZ基因(3075 bp)都成功了。 有做過相關實驗的老師同學還請多多指教 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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