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飛不動D鳥新蟲 (初入文壇)
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[求助]
利用cre/loxp系統(tǒng)進(jìn)行酵母基因的敲除
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| 我想對酵母的一個基因進(jìn)行敲除，看的參考文獻(xiàn)好像都是采用的cre/loxp系統(tǒng)進(jìn)行的敲除，可是我對cre/loxp敲除組件的構(gòu)建還有不懂的地方，主要是在引物的設(shè)計的方面。比如說我做酵母的ERG4基因的敲除，敲除引物說是，5’端的45個堿基與酵母的ERG4基因同源重組，3’端大概有20個bp的堿基與質(zhì)粒pUG6的基因兩側(cè)的上下游的基因序列相同，包括loxp位點，從而把兩者將結(jié)合起來連接成完整的引物。這個引物具體應(yīng)該怎么設(shè)計，因為找了好多的文獻(xiàn)都沒有講到設(shè)計方案的，有沒有大佬可以指點一下。 |
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2樓2020-06-12 09:26:38
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