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| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者飛不動(dòng)D鳥將贈(zèng)送您 10 個(gè)金幣 | |||
飛不動(dòng)D鳥新蟲 (初入文壇)
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[求助]
利用cre/loxp系統(tǒng)進(jìn)行酵母基因的敲除
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| 我想對(duì)酵母的一個(gè)基因進(jìn)行敲除，看的參考文獻(xiàn)好像都是采用的cre/loxp系統(tǒng)進(jìn)行的敲除，可是我對(duì)cre/loxp敲除組件的構(gòu)建還有不懂的地方，主要是在引物的設(shè)計(jì)的方面。比如說我做酵母的ERG4基因的敲除，敲除引物說是，5’端的45個(gè)堿基與酵母的ERG4基因同源重組，3’端大概有20個(gè)bp的堿基與質(zhì)粒pUG6的基因兩側(cè)的上下游的基因序列相同，包括loxp位點(diǎn)，從而把兩者將結(jié)合起來連接成完整的引物。這個(gè)引物具體應(yīng)該怎么設(shè)計(jì)，因?yàn)檎伊撕枚嗟奈墨I(xiàn)都沒有講到設(shè)計(jì)方案的，有沒有大佬可以指點(diǎn)一下。 |
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2樓2020-06-12 09:26:38
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