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YY向前走新蟲 (初入文壇)
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[交流]
微量細(xì)胞提取RNA,trizol保存,如何合并提取
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我有個問題請教一下提取方面專家: 細(xì)胞數(shù)量是10^4數(shù)量級,每管是500ul左右透明的trizol保存,提取的時候覺得提取的RNA量達(dá)不到建庫要求(按照每個細(xì)胞10pg的RNA量算,10^4級別細(xì)胞含的RNA達(dá)不到1ug建庫起始量),所以將多達(dá)12管合并提取。 提取的時候我把trizol轉(zhuǎn)管了,用康為試劑盒,加氯仿吸上清加等體積70%乙醇,過柱子提取。檢測結(jié)果總量達(dá)不到100ng。 請教各位蟲友,哪里做錯了嗎? 我知道每一步都有核酸損失,那是不是因為損失的量達(dá)到了2微克,所以提取失敗? 有沒有很好的解決這種問題的方案呢??? |
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