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skynet999新蟲 (初入文壇)
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[交流]
克隆小白有問題請(qǐng)教~~~ 平板無菌落TT
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求助盆友們~ 最近做了一個(gè)月的cloning無果… 很悲傷 詳情如下: 載體10787bp EcoRI 和BglII雙酶切 酶切位點(diǎn)很近 都是NEB的酶 取5ugDNA 50ul體系 酶切后成功膠回收 濃度大概160ng/ul PCR產(chǎn)物200bp 為了提高片段濃度 合并了幾次pcr產(chǎn)物 然后膠回收 過夜雙酶切 也用的50ul體系 酶切后用PCR產(chǎn)物純化Kit 得到PCR產(chǎn)物濃度大概200ng/ul 連接用了20ul體系 T4連接酶1ul 載體4ul PCR產(chǎn)物6ul 室溫連接兩小時(shí)后轉(zhuǎn)化 第二天平板特別干凈 無克隆菌落… 這是第三次做這個(gè)實(shí)驗(yàn)了 之前兩次也是沒有克隆 不過加的載體和PCR產(chǎn)物量比較少 所以這次加大量 還是無果… 表示不知道什么原因 每次跑膠看條帶也都很正常 實(shí)在找不到癥結(jié)所在 TT 求助大家伙兒……… 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (正式寫手)
木蟲 (職業(yè)作家)
新蟲 (初入文壇)
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Yeast Display
木蟲 (職業(yè)作家)
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有沒有連上,做對(duì)照實(shí)驗(yàn)就知道了。把陽性對(duì)照和陰性對(duì)照都做下 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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[教師之家] 售瀆SCI文章,我:8⊙ 55 1⊙ 54。備注【⊙=0】 +3 | vs9ky3szrj 2026-03-06 | 3/150 |
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[考研] 新疆大學(xué)地質(zhì)與礦業(yè)工程學(xué)院招生 +10 | another12 2026-03-04 | 15/750 |
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[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 倘若起風(fēng)了呢 2026-03-05 | 9/450 |
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[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)312分求調(diào)劑 +4 | T123 tt 2026-03-04 | 4/200 |
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[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +7 | 呼呼?~+123456 2026-03-05 | 10/500 |
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[考研] 紡織、生物、化學(xué)、材料等專業(yè) +3 | Eember. 2026-03-05 | 7/350 |
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[考研] 274環(huán)境工程求調(diào)劑 +6 | 扶柳盈江 2026-03-05 | 6/300 |
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[考研] 材料085600 303求調(diào)劑 +7 | 1bygone 2026-03-04 | 7/350 |
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[考研] 070300化學(xué) 280 一志愿太原理工 求調(diào)劑 +8 | 拾玖壹 2026-03-04 | 8/400 |
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[考研] 材料學(xué)碩080500復(fù)試調(diào)劑294 +3 | 四葉zjz 2026-03-04 | 3/150 |
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[考研] 材料復(fù)試調(diào)劑 +7 | 學(xué)材料的點(diǎn) 2026-03-01 | 8/400 |
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[考研] 材料專碩346求調(diào)劑 +3 | 旺一下 2026-03-04 | 3/150 |
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[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-02 | 4/200 |
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[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 人間唯你是清歡 2026-03-03 | 4/200 |
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[考研] 化學(xué)0703求調(diào)劑 學(xué)碩 理/工科均可 總分279 +3 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
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[考研] 【2026 碩士調(diào)劑】課題組 招收調(diào)劑生 +3 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 5/250 |
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[考研] 285求調(diào)劑 +9 | 滿頭大汗的學(xué)生 2026-02-28 | 9/450 |
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[考研] 0856求調(diào)劑285 +11 | 呂仔龍 2026-02-28 | 11/550 |
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[考研] 材料調(diào)劑 +3 | 恒順自然 2026-03-02 | 3/150 |
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[考研] 279求調(diào)劑 +3 | dua1 2026-03-01 | 4/200 |
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