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小木頭新蟲 (小有名氣)
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[求助]
腦和肝臟RNA提取 已有1人參與
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腦RNA能提出來,雖然拖帶但也可以用,但肝臟的RNA總是提不出來,雖然純度夠了,但降解很嚴(yán)重,根本不能用,這種情況要怎么處理? 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
鐵桿木蟲 (知名作家)
新蟲 (初入文壇)
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取樣的時(shí)候立馬液氮速凍,這個(gè)應(yīng)該是做到了。你試一下買qiagen RNeasy mini KIT,這款盒子裂解液中加巰基乙醇能有效抑制RNase活性。我們實(shí)驗(yàn)室提取的成熟方案是每個(gè)1.5ml RNase-free EP管里加100ul 裂解液RLT(已加巰基乙醇),拿手術(shù)刀 切塊 米粒大 (寧少勿多。。┑母闻K組織,立即浸入裂解液,電動(dòng)勻漿儀(天根牌)勻漿,渦旋混勻。后面結(jié)果很好,檢測RIN值在8、9左右。 或者你用trizol提取的時(shí)候,在trizol里加2%-5%的巰基乙醇。 取樣:肝臟富含RNA酶,而且RNA含量豐富,取樣寧少勿多。米粒大小的不方便用研缽研磨,最好買個(gè)電動(dòng)勻漿儀,也不貴,好像幾百塊而已。 ![]() |
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