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小木頭新蟲 (小有名氣)
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[求助]
腦和肝臟RNA提取 已有1人參與
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腦RNA能提出來(lái)，雖然拖帶但也可以用，但肝臟的RNA總是提不出來(lái)，雖然純度夠了，但降解很嚴(yán)重，根本不能用，這種情況要怎么處理？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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choujiaoqi
鐵桿木蟲 (知名作家)
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2樓2019-04-30 18:00:30
YY向前走
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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取樣的時(shí)候立馬液氮速凍，這個(gè)應(yīng)該是做到了。你試一下買qiagen RNeasy mini KIT，這款盒子裂解液中加巰基乙醇能有效抑制RNase活性。我們實(shí)驗(yàn)室提取的成熟方案是每個(gè)1.5ml RNase-free EP管里加100ul 裂解液RLT（已加巰基乙醇），拿手術(shù)刀 切塊 米粒大 （寧少勿多�。。┑母闻K組織，立即浸入裂解液，電動(dòng)勻漿儀（天根牌）勻漿，渦旋混勻。后面結(jié)果很好，檢測(cè)RIN值在8、9左右。 或者你用trizol提取的時(shí)候，在trizol里加2%-5%的巰基乙醇。 取樣：肝臟富含RNA酶，而且RNA含量豐富，取樣寧少勿多。米粒大小的不方便用研缽研磨，最好買個(gè)電動(dòng)勻漿儀，也不貴，好像幾百塊而已。  |
3樓2019-05-15 11:16:31
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