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[求助]
求助啟動(dòng)子構(gòu)建載體問題 已有1人參與
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| 求助大家�。�！我目前在克隆啟動(dòng)子，好不容易P出了2600bp左右的條帶，回收之后構(gòu)建到PBI121和PAbAi載體上，重復(fù)做了不少于20次，都能長出菌斑，但是鑒定都沒有陽性克隆。我檢查了回收的片段產(chǎn)物，酶切產(chǎn)物都沒有問題，也試過了不同的比例（片段產(chǎn)物/酶切產(chǎn)物），但還是沒有用。但這是我的畢業(yè)課題，也不能一直拖著吧，然后找生物公司幫忙做，他們看了我的序列說是靠近CDS區(qū)域的序列AT含量太高，GC含量低，并且是構(gòu)建到低拷貝載體上，不容易做，但他們做了半個(gè)月了，也沒啥動(dòng)靜，簡(jiǎn)直是急死我了。。。�！，F(xiàn)在不知道要咋辦了，所以請(qǐng)大家?guī)臀铱匆幌�，有什么辦法解決沒有。不勝感激�。�！ |
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di_chen3樓2019-03-20 05:16:17
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9樓2019-03-21 12:24:20
10樓2019-03-21 13:44:50
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