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星星不太萌新蟲 (小有名氣)
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[求助]
構(gòu)建載體 已有1人參與
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載體和目的片段連接好后,挑陽性克隆菌落,PCR驗證有目的條帶,酶切驗證卻切不下來,送PCR產(chǎn)物,測序結(jié)果顯示目的序列在,就是酶切不下來,請教各位大神,這是什么原因呢? @wizardfan @biostar2009 @youlinglyw @飛約瘋?cè)嗽?/u> @飛約瘋?cè)嗽?/u> 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)
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1. 內(nèi)切酶或者buffer的問題(不過你目的基因和載體都切好了證明沒問題);2.質(zhì)粒提取濃度低或者質(zhì)量不好(搖菌8小時以上再提質(zhì)粒,可以適當(dāng)加大菌液使用量);3.直接送質(zhì)粒去測序 進(jìn)行驗證 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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一般質(zhì)粒提取的濃度8ml菌液可以提300多ng/ul,還是直接送質(zhì)粒測序比較可靠,菌液PCR和提質(zhì)粒PCR跑出來的條帶不一樣。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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