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[交流]
細(xì)胞凋亡檢測
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| 請問,我現(xiàn)在準(zhǔn)備用流式檢測細(xì)胞凋亡,但是我的細(xì)胞用不含EDTA的胰酶很難消化,做流式的時候有什么方法可以避免我的問題嗎 |
木蟲 (正式寫手)

| 單細(xì)胞懸液就可以,如果是組織細(xì)胞,怕堵管的話,可以過一下30um的濾網(wǎng)。流式檢測細(xì)胞凋亡常見的也就是BIODAI流式細(xì)胞儀分析:激發(fā)波長為488 nm,F(xiàn)ITC的綠色熒光在FL1通道檢測,PI的紅色熒光在FL2或FL3通道檢測,建議使用FL3。用CellQuest等軟件進行分析。繪制雙色散點圖(Two-color dot plot),F(xiàn)L1為橫坐標(biāo),F(xiàn)L3為縱坐標(biāo)。每個樣采集10,000 events。典型的實驗中細(xì)胞可以分成三個亞群:活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光;早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光;晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色熒光雙重染色。 |
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