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細(xì)胞凋亡檢測(cè)
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| 請(qǐng)問(wèn),我現(xiàn)在準(zhǔn)備用流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡,但是我的細(xì)胞用不含EDTA的胰酶很難消化,做流式的時(shí)候有什么方法可以避免我的問(wèn)題嗎 |
| 單細(xì)胞懸液就可以,如果是組織細(xì)胞,怕堵管的話,可以過(guò)一下30um的濾網(wǎng)。流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡常見(jiàn)的也就是BIODAI流式細(xì)胞儀分析:激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm,F(xiàn)ITC的綠色熒光在FL1通道檢測(cè),PI的紅色熒光在FL2或FL3通道檢測(cè),建議使用FL3。用CellQuest等軟件進(jìn)行分析。繪制雙色散點(diǎn)圖(Two-color dot plot),F(xiàn)L1為橫坐標(biāo),F(xiàn)L3為縱坐標(biāo)。每個(gè)樣采集10,000 events。典型的實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞可以分成三個(gè)亞群:活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光;早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光;晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色熒光雙重染色。 |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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