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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 反轉錄制備cDNA
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反轉錄制備cDNA
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| 以RNA為模板制備的cDNA是單鏈的，接下來要做熒光定量PCR，需要以cDNA為模板合成第二鏈嗎？如果不需要的話那qPCR的模板就只有一條鏈，設計目的基因和內參基因引物的時候只設計一個引物嗎？我覺得有點怪怪的，不知道我什么地方理解有問題，希望能有詳細的解答，真心謝謝大家 |
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淵博震天: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2019-02-04 16:54:57
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這個不需要合成第二鏈的。rna反轉的cdna本來就是混合池，里面在反轉的過程中已經有的第二鏈的存在。設計相關基因的引物的時候，是一對引物，通常都是根據相關基因的一條鏈設計的，另外一條之后反向互補，這一對引物也是可以擴增出來的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2019-01-31 00:36:51
kangaroo0513
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3樓2019-02-01 07:36:57
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4樓2019-02-01 08:38:47
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5樓2019-02-06 11:43:34
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