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Milkttttea新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
酶切連接構(gòu)建載體一直連接不上
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切入DNA片段1385bp,載體4729bp 跑膠看亮度,片段大概10ng/ul,載體大概40ng/ul 片段加了15ul,載體2ul,buffer2ul,T4連接酶1ul,摩爾比大概1:6.5。 為什么一直連接不上呢?amp板上一個(gè)單克隆都沒(méi)有 卡在這個(gè)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)一個(gè)月多了真的頭禿了! 求幫助! 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
新蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (初入文壇)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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昨天又做了兩板,載體53.2ng/ul,片段15.7ng/ul,儀器測(cè)得濃度,OD260/280都有1.8。1:3比例做了10體系,1:7做了20體系,都沒(méi)有長(zhǎng)單克隆,我真的好迷茫啊,到底問(wèn)題出在哪里了 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
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