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[交流]
用cDNA擴(kuò)增一個(gè)基因,總是擴(kuò)增出帶有內(nèi)含子的片段
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各位蟲友,我要擴(kuò)增一個(gè)基因的cDNA序列,擴(kuò)增出來(lái)的片段總是帶有內(nèi)含子的。因?yàn)橹白鲞^(guò)RACE,知道序列是怎么樣的。要擴(kuò)增基因全長(zhǎng)的時(shí)候總是擴(kuò)增出帶有內(nèi)含子的片段。多次提了RNA,并且這些cDNA我也用來(lái)擴(kuò)增其他的基因,十幾個(gè)基因都沒(méi)有問(wèn)題,跑膠也沒(méi)有看到DNA的條帶,單單這一個(gè)基因擴(kuò)增出來(lái)的片段不對(duì)。 請(qǐng)問(wèn)有沒(méi)有什么好辦法,原因是什么? |
版主 (著名寫手)
己所不欲,勿施于人
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可能這個(gè)基因的某一個(gè)亞型就是帶有這個(gè)內(nèi)含子片段。換句話說(shuō),在某種細(xì)胞中可能這個(gè)內(nèi)含子不被識(shí)別出來(lái),存在一個(gè)帶有它的剪切拼接亞型。如果一定要p出來(lái)和數(shù)據(jù)庫(kù)一樣的序列,要么就換個(gè)細(xì)胞要么就基因合成,現(xiàn)在基因合成也不算貴。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://gaoyang168.com/3g ] |

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