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科研戰(zhàn)神來了新蟲 (小有名氣)
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[交流]
一文理清cDNA與gDNA的區(qū)別
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做分子實驗時,gDNA、cDNA 這兩個詞總混在一起出現(xiàn),看似都是 DNA,實際上并不一樣。01gDNA 來源:直接從動植物、微生物的細(xì)胞 / 組織中提取的天然核 DNA,是生物最核心的天然 DNA。結(jié)構(gòu)特點:包含基因的全部序列—— 既有能編碼蛋白質(zhì)的外顯子,也有大量非編碼序列(內(nèi)含子、啟動子、終止子、增強子等調(diào)控序列),是完整版、無刪減的遺傳信息。特點:同一物種的所有體細(xì)胞 gDNA 完全一致(如人體皮膚細(xì)胞、肝細(xì)胞的 gDNA 序列無差異),無組織 / 時期特異性。02cDNA 來源:實驗室中以細(xì)胞的mRNA(信使 RNA) 為模板,通過反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的人工 DNA,細(xì)胞內(nèi)無天然存在。 結(jié)構(gòu)特點:無內(nèi)含子,無啟動子、終止子等基因組層面的調(diào)控序列,包含外顯子(CDS 編碼區(qū))及成熟 mRNA 上的 5' UTR、3' UTR 序列—— 因為 mRNA 是 gDNA 轉(zhuǎn)錄后,經(jīng) “剪接去掉內(nèi)含子、拼接外顯子” 形成的成熟編碼 RNA,以它為模板反轉(zhuǎn)錄的 cDNA,保留了 mRNA 上所有序列,僅去除了基因組的冗余序列。特點:有極強的組織 / 時期特異性,同一細(xì)胞不同時期、同一物種不同組織的 cDNA 差異極大(如肝細(xì)胞和皮膚細(xì)胞的 mRNA 種類不同,反轉(zhuǎn)錄的 cDNA 也完全不同)。 |
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