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muchongvip12鐵蟲 (初入文壇)
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老師，我現(xiàn)在需要做大麥BSMV-VIGS試驗，在設計引物的時... 已有1人參與
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老師，我現(xiàn)在需要做大麥BSMV-VIGS試驗，在設計引物的時候，我選用了多個片段但是特異性不是唯一，后續(xù)選用3‘UTR區(qū)域進行設計引物，選用250bp作為我的沉默片段，經(jīng)過ncbi blast特異性，以及用primer測了發(fā)夾結(jié)構(gòu)，唯一特異性以及0發(fā)夾結(jié)構(gòu)，一對引物Tm在55，56但是我在擴增的時候我從51到59設置的溫度梯度，以cdna作為模板怎么擴都擴不出來，為了驗證不是cdna的問題，我又用管家基因驗證，出現(xiàn)正確條帶，排除cdna的問題，我想問問各位大佬，3’Utr區(qū)域擴增是否有什么注意事項? @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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woozywoody
鐵蟲 (初入文壇)
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2樓2025-12-31 14:40:06
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