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| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者愛吃旺旺碎冰冰將贈送您 5 個金幣 | |||
愛吃旺旺碎冰冰新蟲 (小有名氣)
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[求助]
pMg36e怎么這么難做啊
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 請教各位大佬：我的質(zhì)粒是pMg36e，目的基因1500bp左右，酶切位點是SacI和PstI，雙酶切最開始連接不上，后來用的套擴目的片段，同源重組連接的，轉(zhuǎn)化涂平板挑單克隆，菌液PCR有條帶,質(zhì)粒跑電泳有條帶但也有點雜帶，質(zhì)粒PCR有條帶，雙酶切驗證有條帶，委托公司設(shè)計引物質(zhì)粒送測顯示沒有連接在預(yù)期的位置上，又用對質(zhì)粒測序的引物進行高保真擴增有明顯的雜帶一個是目的條帶一個是空載條帶，膠回收目的片段送測測兩次都顯示無信號。。。真沒招了，做大半年了馬上畢業(yè)了，還沒做出來。。。救救孩子吧。 |
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