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1073268128新蟲 (小有名氣)
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色譜的種類有哪些？
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吸附色譜 在吸附色譜中，樣品的極性官能團(tuán)牢固地保留在填料的吸附活性中心上，非極性烴基幾乎不予保留。所以，要清楚地辨別極性功能團(tuán)的種類、數(shù)量和位置。通常，樣品能用吸附色譜分離的應(yīng)是能溶解于有機(jī)溶劑并是非離子型的，強(qiáng)離子樣品是不適宜的。 吸附色譜所使用的流動相以正己烷、三氯甲烷、二氯甲烷作為基礎(chǔ)，按照樣品的極性加上乙醇，然而，最好是使所加入醇的濃度為10%或更少一些。如有可能，可進(jìn)一步減小百分?jǐn)?shù)。因?yàn)楦邼舛鹊拇紩䴗p少填料的吸附活性，減弱吸附能力，并使重現(xiàn)困難。 分配色譜 1.正相分配色譜 正相分配色譜適用于不溶于水而溶于有機(jī)溶劑且?guī)в袠O性基團(tuán)的樣品，但正相分配色譜不適合于離子型物質(zhì)。 2.反相分配色譜 這種方法應(yīng)用非常廣泛，應(yīng)用的范圍也很廣，在反相分配色譜中，樣品的非極性部分起保留作用。 通過使用的流動相是水—甲醇和水—乙腈，通過加入甲醇或乙腈的量的不同來調(diào)節(jié)分離，但如果樣品帶有離子型基團(tuán)，需要在流動相中加入鹽或調(diào)節(jié)流動相的PH值，例如，如果樣品有一個—COOH 基團(tuán)，使流動相的PH值是偏向酸性的，由于抑制了—COOH基團(tuán)的電離而加強(qiáng)了保留。這個方法叫離子抑止法，如果樣品有強(qiáng)離子基，有時候采用在流動相中加入適當(dāng)抗衡離子以形成離子對的離子對法。 在調(diào)節(jié)PH值中，保持PH值在填料說明書手冊中所規(guī)定的范圍內(nèi)，大多數(shù)化學(xué)鍵式的二氧化硅使用在PH=2-9，然而，當(dāng)加入鹽以后，最好使其PH=7.5-8或更小的，多孔聚合物填料能應(yīng)用非常廣泛的PH值。 3.離子交換色譜 這個方法是用填料的固定相的離子交換基團(tuán)和樣品的離子基團(tuán)之間的離子交換來分離樣品組分的，按照所交換的離子分成陽離子交換和陰離子交換。 離子交換色譜使用于能溶于水的離子型物質(zhì)。在離子交換色譜中，流動相的鹽的濃度、PH及鹽的種類等都對保留值有很大的影響。在高效液相色譜的離子交換中所用的鹽有磷酸鹽、醋酸鹽和硼酸鹽。因?yàn)槁然飼g不銹鋼儀器，在高效液相色譜中不能使用NaCl或其他的氯化物鹽類。根據(jù)測量波長有些鹽也不能使用，例如，醋酸吸收大約在210nm，當(dāng)檢測處在短波端的時候，用醋酸作流動相是不合適的。 4.凝膠色譜 凝膠色譜不同于以上三種分離方法。凝膠色譜是根據(jù)分子大小用分子篩效應(yīng)來分離樣品組分的。這個方法也叫排阻色譜或粒度排阻色譜。具有一定孔徑的多孔性合成聚合物經(jīng)常用作填料。 因?yàn)樵跇悠分�，小尺寸的分子深深地滲透到微孔中，所以遲流出，而大尺寸的分子沒有滲透到微孔中，就很快流出。通常合成樹脂的分離使用有機(jī)溶劑作流動相，叫做凝膠滲透色譜。 凝膠色譜依樣品的性質(zhì)又可分為凝膠滲透和凝膠過濾。 1.凝膠滲透色譜 凝膠滲透色譜（Gel Permeation Chromatography），簡稱GPC。此一類的色譜，使用于有機(jī)性溶媒的樣品中，如PVC，PS，ABS等等，而所用的洗脫液有THF，Chloroform等等。 2.凝膠過濾色譜 凝膠過濾色譜（Gel Filtrarion Chromatography），簡稱GFC。此一種類的層析法，使用于水溶媒的試劑中，如蛋白質(zhì)、淀粉及水性合成高分子等等，而所用的溶液有水、緩沖液等等。 凝膠的種類很多，按其原料來源可分為有機(jī)膠和無機(jī)膠。按其制備的方法又可分為均勻、半均勻和非均勻三種凝膠。而根據(jù)凝膠的強(qiáng)度又可分為軟膠、半硬膠和硬膠三大類。根據(jù)它對溶劑的適用范圍又可分為親水性、親油性和兩性凝膠等等。 |
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