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Jiman_2025鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
慢病毒感染細(xì)胞后什么時候基因表達(dá)到達(dá)峰值? 已有1人參與
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1.慢病毒表達(dá)時間較慢,一般代謝旺盛的細(xì)胞(如293T、BHK21等)48h后可以觀察到GFP熒光(或者RFP紅色熒光) 2.代謝比較緩慢的細(xì)胞(如原代培養(yǎng)細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞等)GFP(RFP)蛋白表達(dá)所需時間較長,感染后72-96h甚至更長時間可以觀察到GFP(RFP)熒光 3.過表達(dá)慢病毒因載體中插入目的基因序列,可能熒光相比對照病毒稍弱 4.如載體中帶有cas9/dcas9等較大蛋白,建議感染后7~10天再繼續(xù)下游實驗 感染后期請根據(jù)細(xì)胞生長的情況對細(xì)胞進(jìn)行換液或傳代,以保證良好的生長狀態(tài) |
新蟲 (小有名氣)
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