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科研戰(zhàn)神來了新蟲 (小有名氣)
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[交流]
做cck8/MTT一定要避開這些坑！
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1、若是加藥測細(xì)胞活力，首先判斷💊是否帶有顏色？若有顏色很可能與cck8/MTT反應(yīng)，導(dǎo)致所有孔的od值亂亂的，這是需要做陰性對照，也就是：沒有細(xì)胞，只加藥的孔～ 最后：有細(xì)胞的孔o(hù)d值➖陰性對照od值🟰最終od值 2、96孔板四周邊緣的孔，不要加細(xì)胞檢測，有概率污染，可以用pbs補(bǔ)充。 3、96孔板有些蓋子和孔板不是很貼合，蓋上以后檢查一下是否完全蓋上了？有些孔板需要大力磕一下才能完全蓋上，蓋不緊的話容易污染。 4、處理24小時(shí)可以用100ul細(xì)胞懸液，若處理48小時(shí)甚至更久，建議用200ul細(xì)胞懸液，但細(xì)胞量不變，只改變體積即可！細(xì)胞量可用1萬/100ul～ 5、可做5個(gè)復(fù)孔，od值測出來后，舍去最大值and最小值，剩下的3個(gè)值作圖，盡可能減少非必要的重復(fù)🔁！ 6、酶標(biāo)儀測吸光度時(shí)，盡量不要有氣泡，若有過多氣泡，如果實(shí)驗(yàn)室有吹風(fēng)機(jī)，可以用吹風(fēng)機(jī)斜著吹1～2秒，氣泡會(huì)立馬消失的，不會(huì)影響結(jié)果～ 7、96孔板鋪板不需要特意搖晃孔板混勻哦，細(xì)胞加進(jìn)去即可，加藥，加cck8以后，用手輕拍孔板側(cè)邊就行，然后再放入培養(yǎng)箱。 8、貼壁細(xì)胞比較簡單，可換液，懸浮細(xì)胞鋪板以后就不要再換液了。 |
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