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求助大佬:AKTA Avant方法開發(fā)時峰形拖尾該怎么優(yōu)化?
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| 想請教一下各位在用AKTA Avant做單抗純化時有沒有遇到過酸性峰拖尾特別嚴(yán)重的情況——我們最近摸方法時發(fā)現(xiàn)即使上了精氨酸緩沖液并且梯度設(shè)得賊平緩,目的蛋白的峰還是像蝸牛爬一樣拖個沒完,明明系統(tǒng)流速和pH都校準(zhǔn)過了,預(yù)裝柱也是新的HiScreen™系列,但就是壓不住這個尾巴,看文獻(xiàn)說可能和樣品負(fù)載量或者填料特性有關(guān),但AKTA Avant自帶的Unicorn方法里似乎沒有專門針對疏水作用導(dǎo)致的拖尾的優(yōu)化模塊(或者是我沒找到?),所以想蹲個實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn):除了調(diào)整緩沖液離子強(qiáng)度或者換填料這種大招之外,有沒有什么藏在軟件高級設(shè)置里的騷操作或者梯度微調(diào)技巧能救救這種尷尬的峰型?先給遞茶了🍵 |
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