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夏末～易科新蟲 (小有名氣)
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[交流]
小鼠缺血再灌注急性腎損傷模型
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小鼠缺血再灌注急性腎損傷模型 1、物品準(zhǔn)備：保溫墊（2個(gè)）、動(dòng)物理發(fā)器（1個(gè)）、手術(shù)器械：鑷子（3-4個(gè)）、眼科剪（2個(gè)）、微動(dòng)脈瘤夾（多個(gè)）、持針器、4-0和5-0帶針縫合線（如果一次做得多就帶多點(diǎn)）、 1ml注射器、棉簽、紗布、生理鹽水、麻醉藥（4%水合氯醛）、手術(shù)操作板、消毒巾等。 2、動(dòng)物選擇：建議周齡8-12w大小的雄性C57BL/6，同一批實(shí)驗(yàn)的小鼠周齡相差應(yīng)＜1周，雄性小鼠對AKI更易感。 3、麻醉： 腹腔注射（腹中線外0.5cm、頭低尾高位、進(jìn)針深度小于1cm為宜）4%水合氯醛，0.1ml/10g；剃毛，然后用 70% 的酒精棉簽將手術(shù)區(qū)域的皮小鼠放在保溫墊上，沿背部切開左側(cè)的皮膚和肌肉，露出左腎，切口位于小鼠背部 1/3 處，切口大小為 1-1.5 cm。然后用無菌棉簽將腎臟從切口中推出以暴露腎蒂。用鑷子稍微去除腎蒂周圍的脂肪組織，將左腎放回腹腔。右腎蒂采用類似的方法去除周圍組織，但右腎位置不同，切口更靠近肋骨，腎蒂準(zhǔn)備好后，兩個(gè)腎臟都放回腹腔中。用棉簽輕輕地將右腎推出體腔，露出腎蒂，用微動(dòng)脈夾住，記錄右腎缺血時(shí)間，可以觀察到腎臟從紅色變?yōu)樯钭仙砻鲓A閉成功。觀察到腎臟顏色變化后，將腎臟放回腹腔。然后夾閉左腎蒂，記錄缺血時(shí)間。左右腎鉗夾之間有大約相差 1-1.5 分鐘的時(shí)間。這里最好分別記錄每側(cè)的缺血時(shí)間，以確保兩個(gè)腎臟缺血時(shí)間相同。 4、缺血時(shí)間足夠后，松開動(dòng)脈夾，開始再灌注，可以觀察到腎臟由深紫色變?yōu)榧t色，然后分別縫合肌肉層（連續(xù)縫合，不要留有空隙，容易感染和愈合不良），再縫合皮膚（間斷縫合），結(jié)束后立即給每只小鼠腹腔內(nèi)注射0.5 ml溫?zé)岬臒o菌鹽水。然后將動(dòng)物放在加熱墊上，直到它完全清醒，然后再放回籠子，因?yàn)樾g(shù)后小鼠活動(dòng)不佳，這里要用水泡一些飼料放在籠子里，方便小鼠補(bǔ)充能量和水分，恢復(fù)更快。 5.缺血時(shí)間：可能是由于實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌煌奈墨I(xiàn)夾閉腎蒂的時(shí)間不同，大部分文獻(xiàn)的缺血時(shí)間在20-40min不等，具體夾閉多久還要取決于自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮筒僮�，同時(shí)還要保證存活率和實(shí)驗(yàn)效果，可以設(shè)置多個(gè)缺血時(shí)間的組別，進(jìn)行探索，選擇存活率較高、最適合自己實(shí)驗(yàn)的缺血時(shí)間。膚擦干凈，置于保溫墊上，使體溫回升 發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
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