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夏末～易科新蟲(chóng) (小有名氣)
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大鼠糖尿病模型實(shí)驗(yàn)流程及注意事項(xiàng)
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一、常用糖尿病模型類(lèi)型及選擇 模型類(lèi)型 適用研究 周期 優(yōu)缺點(diǎn) STZ單次大劑量誘導(dǎo)（Ⅰ型） 胰島素缺乏、酮癥酸中毒研究 3-7天成模 成�？�，但易致死（需控制劑量）。 高脂飲食+小劑量STZ（Ⅱ型） 胰島素抵抗+β細(xì)胞功能衰退 8-12周 更接近人類(lèi)T2DM，穩(wěn)定性高。 自發(fā)性模型（ZDF/GK大鼠） 遺傳性糖尿病機(jī)制研究 長(zhǎng)期（>12周） 成本高，周期長(zhǎng)，但病理更自然。 二、STZ誘導(dǎo)Ⅰ型糖尿病模型流程 1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備動(dòng)物：SD或Wistar大鼠（雄性，180-220 g），空腹12小時(shí)（禁食不禁水）。 試劑：鏈脲佐菌素（STZ，Sigma，需避光現(xiàn)配，用0.1 M檸檬酸鈉緩沖液pH 4.5溶解，冰浴）。 血糖試紙、胰島素ELISA試劑盒。 2. 造模步驟 1. STZ注射： 劑量：50-65 mg/kg（單次腹腔注射，具體劑量預(yù)實(shí)驗(yàn)確定）。 對(duì)照：注射等體積檸檬酸鈉緩沖液。 2. 血糖監(jiān)測(cè)： 注射后48小時(shí)測(cè)尾尖隨機(jī)血糖≥16.7 mmol/L（300 mg/dL）為成模標(biāo)準(zhǔn)。 每周監(jiān)測(cè)1-2次，維持高血糖狀態(tài)。 3. 術(shù)后管理 飲水補(bǔ)充：10%蔗糖水48小時(shí)（預(yù)防STZ急性低血糖） 抗感染：必要時(shí)添加抗生素（如諾氟沙星）至飲水 三、高脂飲食+小劑量STZ誘導(dǎo)Ⅱ型糖尿病流程 1. 高脂飲食預(yù)喂養(yǎng) 飼料配方：45-60%脂肪（如D12451，Research Diets） 周期：4-8周，誘導(dǎo)胰島素抵抗（每周測(cè)體重、空腹血糖）。 2. STZ注射 劑量：25-35 mg/kg多次低劑量，如連續(xù)3-5天。 成模標(biāo)準(zhǔn)：空腹血糖≥11.1 mmol/L（200 mg/dL），伴胰島素抵抗（HOMA-IR升高）。 3. 檢測(cè)指標(biāo) 口服糖耐量（OGTT）：禁食6小時(shí)后灌胃葡萄糖2 g/kg，測(cè)0/30/60/120 min血糖。 胰島素耐量ITT：腹腔注射胰島素0.5-1 U/kg，測(cè)血糖下降速率 四、關(guān)鍵注意事項(xiàng) 1. STZ操作要點(diǎn) 避光避熱：STZ溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用（15分鐘內(nèi)注射完畢），冰浴保存 劑量校準(zhǔn)：不同批次STZ活性差異大，需預(yù)實(shí)驗(yàn)（建議從低劑量開(kāi)始） 2. 動(dòng)物福利 血糖控制：若血糖持續(xù)>30 mmol/L，需胰島素干預(yù)（如甘精胰島素1-2 U/kg）或人道終點(diǎn)。 并發(fā)癥監(jiān)測(cè)：多飲多尿（記錄飲水量）、體重下降、白內(nèi)障（定期眼科檢查） 3. 模型驗(yàn)證 胰腺病理：HE染色觀察β細(xì)胞壞死Ⅰ型或胰島淀粉樣沉積Ⅱ型。 血清指標(biāo)：胰島素（ELISA）、糖化血紅蛋白HbA1c 五、實(shí)驗(yàn)流程表示例（高脂飲食+STZ） Week 1-8 高脂飲食喂養(yǎng)，每周測(cè)空腹血糖、體重 Week 8 小劑量STZ（30 mg/kg×3天，腹腔注射） Week 9-12 繼續(xù)高脂飲食，監(jiān)測(cè)OGTT、ITT Week 12 取材（血清、胰腺、肝臟），病理分析 發(fā)自小木蟲(chóng)手機(jī)客戶(hù)端 |
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