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夏末～易科新蟲 (小有名氣)
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[交流]
大鼠糖尿病模型
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大鼠糖尿病模型實(shí)驗(yàn)流程及注意事項(xiàng) 一、常用糖尿病模型類型及選擇 模型類型 適用研究 周期 優(yōu)缺點(diǎn) STZ單次大劑量誘導(dǎo)（Ⅰ型） 胰島素缺乏、酮癥酸中毒研究 3-7天成模 成模快，但易致死（需控制劑量）。 高脂飲食+小劑量STZ（Ⅱ型） 胰島素抵抗+β細(xì)胞功能衰退 8-12周 更接近人類T2DM，穩(wěn)定性高。 自發(fā)性模型（ZDF/GK大鼠） 遺傳性糖尿病機(jī)制研究 長(zhǎng)期（>12周） 成本高，周期長(zhǎng)，但病理更自然。 二、STZ誘導(dǎo)Ⅰ型糖尿病模型流程 1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 動(dòng)物：SD或Wistar大鼠（雄性，180-220 g），空腹12小時(shí)（禁食不禁水）。 試劑： 鏈脲佐菌素（STZ，Sigma，需避光現(xiàn)配，用0.1 M檸檬酸鈉緩沖液pH 4.5溶解，冰�。�。 血糖試紙、胰島素ELISA試劑盒。 2. 造模步驟 1. STZ注射： 劑量：50-65 mg/kg（單次腹腔注射，具體劑量預(yù)實(shí)驗(yàn)確定）。 對(duì)照：注射等體積檸檬酸鈉緩沖液。 2. 血糖監(jiān)測(cè)： 注射后48小時(shí)測(cè)尾尖隨機(jī)血糖≥16.7 mmol/L（300 mg/dL）為成模標(biāo)準(zhǔn)。 每周監(jiān)測(cè)1-2次，維持高血糖狀態(tài)。 3. 術(shù)后管理 飲水補(bǔ)充：10%蔗糖水48小時(shí)（預(yù)防STZ急性低血糖）。 抗感染：必要時(shí)添加抗生素（如諾氟沙星）至飲水。 三、高脂飲食+小劑量STZ誘導(dǎo)Ⅱ型糖尿病流程 1. 高脂飲食預(yù)喂養(yǎng) 飼料配方：45-60%脂肪（如D12451，Research Diets）。 周期：4-8周，誘導(dǎo)胰島素抵抗（每周測(cè)體重、空腹血糖）。 2. STZ注射 劑量：25-35 mg/kg（多次低劑量，如連續(xù)3-5天）。 成模標(biāo)準(zhǔn)：空腹血糖≥11.1 mmol/L（200 mg/dL），伴胰島素抵抗（HOMA-IR升高）。 3. 檢測(cè)指標(biāo) 口服糖耐量（OGTT）：禁食6小時(shí)后灌胃葡萄糖（2 g/kg），測(cè)0/30/60/120 min血糖。 胰島素耐量（ITT）：腹腔注射胰島素（0.5-1 U/kg），測(cè)血糖下降速率。 四、關(guān)鍵注意事項(xiàng) 1. STZ操作要點(diǎn) 避光避熱：STZ溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用（15分鐘內(nèi)注射完畢），冰浴保存。 劑量校準(zhǔn)：不同批次STZ活性差異大，需預(yù)實(shí)驗(yàn)（建議從低劑量開始）。 2. 動(dòng)物福利 血糖控制：若血糖持續(xù)>30 mmol/L，需胰島素干預(yù)（如甘精胰島素1-2 U/kg）或人道終點(diǎn)。 并發(fā)癥監(jiān)測(cè)：多飲多尿（記錄飲水量）、體重下降、白內(nèi)障（定期眼科檢查）。 3. 模型驗(yàn)證 胰腺病理：HE染色觀察β細(xì)胞壞死（Ⅰ型）或胰島淀粉樣沉積（Ⅱ型）。 血清指標(biāo)：胰島素（ELISA）、糖化血紅蛋白（HbA1c）。 五、實(shí)驗(yàn)流程表示例（高脂飲食+STZ） | Week 1-8 | 高脂飲食喂養(yǎng)，每周測(cè)空腹血糖、體重 | | Week 8 | 小劑量STZ（30 mg/kg×3天，腹腔注射） | | Week 9-12 | 繼續(xù)高脂飲食，監(jiān)測(cè)OGTT、ITT | Week 12 取材（血清、胰腺、肝臟），病理分析 六、常見問題與解決 問題 原因 解決方案 STZ注射后死亡率高 急性β細(xì)胞毒性 降低劑量至40 mg/kg，補(bǔ)充蔗糖水 高脂飲食未誘導(dǎo)胰島素抵抗 飲食脂肪比例不足 提高至60%脂肪，延長(zhǎng)預(yù)喂養(yǎng)時(shí)間 血糖波動(dòng)大 應(yīng)激或感染 固定檢測(cè)時(shí)間，避免操作應(yīng)激 發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
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