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夏末～易科

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CCK8細胞增殖曲線繪制
CCK8??是細胞增殖表型hin重要的一個實驗[贊R]
原理：WST-8（四唑鹽）是 CCK-8 的主要成分，呈粉色[紅色心形R]。在電子載體（1-Methoxy PMS）的作用下被線粒體中的脫氫酶還原為黃色[黃色心形R]甲臜類染料（Formazan），并釋放到細胞外溶解在培養(yǎng)基中，生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在 450nm 波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量
注意事項??：
1??細胞要充分消化，而且一定要鋪勻，還不能過密，一般3000個細胞/孔，不同細胞還需要調整
2??關于CCK8孵育1-4h，具體時間可以做預實驗摸索，得到CCK8最佳反應時間
3??CCK8最好配成10%稀釋液（用完全培養(yǎng)基稀釋）加到細胞中
4??最好用雙波長檢測，檢測波長450nm，參比波長600nm，參比波長可以過濾掉因為液體渾濁，孔板底部不干凈帶來的測量誤差（OD450-OD600即可，但是我比較懶，沒測參比波長[偷笑R]）
5??每天定點測量，孵育CCK8的時間也都保持一致
6??其實96孔板不太容易污染，可以直接用培養(yǎng)細胞的96孔板進行測定，盡快測定，測完蓋上蓋子放回即可，但是我們酶標儀距離培養(yǎng)室有一定距離，所以我會把上清吸到新的96孔板中（洗一洗晾干下次接著用它測）

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