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Longlight鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
熒光計(jì)是如何測量DNA、RNA以及蛋白質(zhì)濃度的
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市面上出現(xiàn)的熒光計(jì)（如達(dá)遠(yuǎn)辰光LLQT1、賽默飛Qubit）的作用原理基于熒光染料與特異靶分子結(jié)合的定量分析技術(shù)，其核心優(yōu)勢在于高特異性和靈敏度。 一、核心工作原理 1. 熒光染料選擇性結(jié)合 達(dá)遠(yuǎn)辰光熒光計(jì)使用熒光染料（如dsDNA HS染料、RNA IQ染料），這些染料僅與目標(biāo)分子（如DNA、RNA、蛋白質(zhì)）特異性結(jié)合，而不會(huì)與雜質(zhì)（如游離核苷酸、鹽離子）反應(yīng)。例如，檢測雙鏈DNA時(shí)，染料僅與dsDNA結(jié)合，單鏈DNA或RNA不會(huì)產(chǎn)生熒光信號(hào)。 2. 熒光信號(hào)檢測與定量 激發(fā)光源（如LED）發(fā)出特定波長光（如502 nm激發(fā)dsDNA染料），激發(fā)結(jié)合了染料的靶分子發(fā)出熒光（如532 nm發(fā)射光）。檢測器通過濾光片分離熒光信號(hào)，避免瑞利散射光干擾，最終將信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)并輸出定量結(jié)果。 3. 低濃度靈敏度 達(dá)遠(yuǎn)辰光的熒光計(jì)的檢測下限可達(dá)0.01 ng/μL DNA或0.02 ng/μL蛋白質(zhì)，遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)紫外吸光法（如Nanodrop的最低檢測限為2 ng/μL DNA）。例如，使用賽默飛Qubit dsDNA HS試劑盒可檢測0.2–100 ng/μL范圍的DNA。 |
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