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qPCR擴(kuò)不出來
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我從文獻(xiàn)里找到對應(yīng)功能基因的引物,送去公司構(gòu)建質(zhì)粒,電泳結(jié)果也是跑得出來的,但是一做qPCR就沒任何結(jié)果,這是什么原因呢?(站內(nèi)沒法發(fā)圖片,圖片我放到網(wǎng)盤里) 圖1,是公司跑電泳的結(jié)果,感覺沒什么問題 圖2,是擴(kuò)增曲線,只有標(biāo)線的部分才出現(xiàn)曲線,其他待測樣品部分并沒有出現(xiàn)曲線 圖3,是熔解曲線 圖4,是Ct結(jié)果部分,綠色的部分是我標(biāo)線的地方,邊框加粗的部分是我的待測樣品 我本以為是樣品中濃度過低,需要增加循環(huán)數(shù)才行,但我從40個(gè)循環(huán)增加到60個(gè)循環(huán)也是這個(gè)樣子,現(xiàn)在我已經(jīng)不知道要怎么進(jìn)一步處理了,難道是我引物和我的樣品情況不匹配嗎?如果是,那為什么電泳的部分能夠跑出條帶來? 文件鏈接 鏈接:https://pan.baidu.com/s/1ij6Ac4oYdu9OcR6-HUOF1Q 提取碼: xijb |
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