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youngman57鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
質(zhì)粒中多余片段的消除 已有4人參與
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| 想問(wèn)一下各位大佬，怎么將質(zhì)粒上多余的片段刪掉，我用的無(wú)縫克隆的方法，但是失敗了，我先設(shè)計(jì)引物pcr，之后連接轉(zhuǎn)化到dh5α中，在培養(yǎng)基中也長(zhǎng)出了單菌落，就是使用菌落pcr時(shí)p不出來(lái)?xiàng)l帶，按道理來(lái)說(shuō)應(yīng)該有條帶的，對(duì)照我用的質(zhì)粒可以p出來(lái)，三千的條帶，刪除多余的按道理來(lái)說(shuō)應(yīng)該有二千的條帶，但是就什么條帶都沒(méi)有，不知道怎么回事，望大佬能說(shuō)一下，我實(shí)驗(yàn)室有人也是真么做的就可以。 |
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2樓2024-11-05 09:18:45
1420488582
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3樓2024-11-12 11:00:30
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4樓2024-12-18 11:32:03
huanglyxm
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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同源臂可以稍微長(zhǎng)一點(diǎn)，反正引物低于59個(gè)堿基都是五毛錢(qián)，20個(gè)bp的同源臂總覺(jué)得不太夠。 發(fā)自小木蟲(chóng)手機(jī)客戶端 |
5樓2024-12-24 11:36:08
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