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專業(yè): 腫瘤綜合治療

[交流] 胃癌動物模型及常用細胞株

胃癌（gastric carcinoma）是指原發(fā)于胃的上皮源性惡性腫瘤。根據2020年中國最新數據，胃癌發(fā)病率和死亡率在各種惡性腫瘤中均位居第三。全球每年新發(fā)胃癌病例約120萬，中國約占其中的40%。胃癌的發(fā)生由多種因素共同造成，其中最常見的病因包括幽門螺桿菌（Hp）感染，癌前病變、遺傳因素、環(huán)境和飲食因素等。胃癌的病理類型主要是腺癌，也有鱗狀細胞癌、腺鱗癌、類癌、小細胞癌等。按組織結構不同，腺癌還可分為乳頭狀癌、管狀腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌和印戒細胞癌。
我國早期胃癌占比很低，僅約20%，大多數發(fā)現時已是進展期，總體5年生存率不足50%。近年來隨著胃鏡檢查的普及，早期胃癌比例逐年增高。手術治療是胃癌最重要的治療方法，早期胃癌術后5年生存率可達90.9%-100%，然后晚期胃癌5年生產率仍不足30%。進展期患者需要根據胃癌病理學類型及臨床分期，采用以手術治療為主，聯(lián)合圍手術期化療（氟尿嘧啶、奧沙利鉑、紫杉醇等）、生物靶向治療（曲妥珠單抗、雷莫蘆單抗、阿帕替尼、派姆單抗等）、放療等手段綜合治療。
圖片

胃癌常用的動物模型

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實驗動物包括非人靈長類動物、犬、兔子及大鼠、小鼠、裸鼠等�？紤]到成本、誘發(fā)率、飼養(yǎng)等原因，大鼠、小鼠和裸鼠較為常用。

1、基因工程小鼠模型

INS‐GAS小鼠是一種胃泌素過度表達的轉基因小鼠，在無外界刺激的情況下，自發(fā)形成胃癌。當INS‐GAS小鼠感染幽門螺桿菌時，可加速胃癌的發(fā)生。這種受Hp感染的INS‐GAS小鼠建立的胃癌實驗動物模型，主要用來檢查與胃癌發(fā)生相關的各種基因表達、促進劑或拮抗劑、腫瘤細胞的凋亡因素等。
Wnt1轉基因小鼠、K-Ras和COX-2轉基因小鼠。最常見的K-Ras轉基因小鼠是利用K19啟動子過表達致癌基因K-Ras（G12D），38％的這些小鼠在16個月齡時表現出胃黏膜腸上皮化生和胃腺癌的形成。K-Ras（G12D）小鼠出現了早期趨化因子（如CXCL1）上調以及炎性細胞和成纖維細胞聚集的現象，這些都與胃癌的發(fā)生相關。這種基因工程小鼠可以用來檢查與胃癌有關的各種基因表達、基因治療、腫瘤細胞相關凋亡因素等，但基因工程小鼠價格昂貴，且多為單個基因的改變。

2、誘導模型

化學誘癌劑包括：甲基硝基亞硝基胍（MNNG）、甲基亞硝基脲（MNU）、乙基硝基亞硝基胍（ENNG）等。
不同劑量MNNG所誘導的Wistar大鼠中胃癌發(fā)病率的不同，且男性發(fā)病率要遠高于女性，化學誘癌劑的誘癌方法相對簡便、誘癌率高，誘導的胃癌實驗動物模型與人胃癌的自然發(fā)生機制比較相似，但該法誘導周期長，不適宜用于短期實驗，且不適合用于批量實驗。
也可以利用幽門螺桿菌(Hp)來誘導大鼠高分化腺癌，不過單用Hp誘導胃癌實驗動物模型，不僅誘導成瘤率低，而且周期會相對更長，目前已很少用，多被Hp聯(lián)合化學誘癌劑替代。
化學誘癌劑聯(lián)合Hp構建的胃癌實驗動物模型不僅可以近似的模擬人體胃癌發(fā)生發(fā)展過程，而且可以在發(fā)展過程中對實驗動物的整體和局部作出評估，對于研究胃癌的病因學與生物學行為有著重要意義，但其誘導周期相對較長，不適宜用于批量實驗研究。

3、種植模型

1、異位種植

胃癌異位種植模型是將胃癌細胞種植在胃以外的部位，其中將腫瘤細胞接種于皮下由于具有操作簡單、腫瘤表淺、便于觀察、潛伏期短等特點，是目前最常見的接種部位。
異位接種模型造模操作簡單，成瘤率高，周期短，實驗人員常用該種模型研究各種抗腫瘤藥物的干預效果、各種免疫細胞免疫效應、分子靶向藥物的療效等方面。但異位模型不能真實的反映腫瘤細胞所處的微環(huán)境對腫瘤的影響，其生物學行為與人胃癌不相符。
2、原位種植

相比于異位種植模型，原位種植模型更接近能夠真實模擬胃癌細胞在人體內的侵襲、轉移等生物學行為和特征；與化學誘變劑和Hp誘導模型相比，種植模型的誘導周期更短，更有利于研究。目前多用種植模型來研究胃癌生物學行為、對新型抗腫瘤藥物進行篩選、評價分子靶向藥物的療效等。
原位種植模型按照腫瘤細胞組織形態(tài)的不同，可分為細胞懸液模型和組織塊模型。
①細胞懸液模型：目前常用于胃癌種植的細胞懸液有SGC-7901（人胃低分化腺癌細胞系）、MGC803（低分化粘液腺癌）、MKN45（胃低分化腺癌）、AZ521（人胃癌細胞系）、VX2（兔鱗狀細胞乳頭狀癌）等。
②組織塊種植模型：組織塊種植模型是目前的主流建模方法，將胃癌細胞懸液種植于實驗動物的皮下，待其成瘤達一定體積時，將組織塊移植到實驗動物的胃中或者將手術切除的人胃癌組織塊直接接種于實驗動物的胃中建立模型。
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MDL常用的部分胃癌細胞株

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MKN45：來源于62歲的亞洲女性患者中分離出的低分化腺癌細胞，MKN-45的癌胚抗原(CEA) 的產生高于正常水平。

HGC-27：來源胃癌患者的轉移性淋巴結灶，未分化，能分泌粘液素，該細胞株除腺苷三磷酸酶、乳酸脫氫酶和亮氨酸氨肽酶外，酶活性普遍很低。

MGC803：來源于53歲男性原發(fā)性胃低分化粘液樣腺癌患者建立的，STR檢測位點同HELA，但顯示出一些特定的差異，表明可能存在雜交細胞系。

SGC-7901：來源于一位56歲女性胃腺癌患者的淋巴結轉移灶。研究檢測發(fā)現STR于HELA多株細胞為同一遺傳背景，懷疑彼此間存在交叉污染，也可能為HELA細胞的衍生物。

AGS：來源于人胃腺癌細胞，經皮下成瘤檢測實驗表明該細胞系在皮下接種后，能正常成瘤。

MKN74：來源于一名37歲胃中分化管狀腺癌男性患者肝轉移病灶的細胞，細胞EBV、HBV、HIV-1、HIV-2陰性。MKN74細胞曾經感染支原體并通過MC-210消除支原體。

MKN45：來源于一位62歲患有印戒細胞癌的女性的胃淋巴結。

SNU-1：來源于一位44歲的韓國男性經細胞毒性治療前取出的低分化原位胃癌中建立的細胞株。SNU-1細胞L-多巴脫羧酶 (DDC)表達陰性、VIP受體表達陽性，但胃受體缺失。沒有注意到SNU-1細胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受體基因的擴增或重排的證據。

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1樓 2024-10-16 13:10:05

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