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蘇州默迪夫新蟲 (初入文壇)
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多肽的溶解性
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多肽的溶解性受其極性影響極大。 酸性的蛋白在堿性溶液中溶解，而堿性蛋白則會(huì)在酸性溶液中溶解。含有大量不帶電荷的極性氨基酸殘基或疏水性氨基酸的疏水性多肽和中性多肽，首先溶解在少量的有機(jī)溶劑中，如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或異丙醇，再加入蒸餾水進(jìn)行稀釋。然而，對(duì)于那些含有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽，DMSO并不是一個(gè)適合的溶劑，因?yàn)樗赡軙?huì)引發(fā)側(cè)鏈的氧化。 多肽溶解之前，建議進(jìn)行多肽溶解測試。將多肽在多種不同的溶劑中進(jìn)行嘗試，找到最合適的溶劑。使用超聲處理可以幫助打破顆粒，提高溶解度。但注意，超聲處理可能會(huì)引發(fā)溶液發(fā)熱并導(dǎo)致多肽降解。 1.將每個(gè)酸性氨基酸賦值為－1，包括天冬氨酸（D）、谷氨酸（E）、以及羧基末端-COOH。每個(gè)堿性氨基酸賦值為＋1，包括精氨酸（R）、賴氨酸（K）、組氨酸（H）以及氨基末端-NH2。然后計(jì)算整個(gè)多肽的電荷數(shù)。 2.如果整段肽所帶電荷是陽性的，說明該肽是堿性的�？上葒L試用蒸餾水來溶解；如果不溶于水，接著嘗試用少量10%-25%醋酸溶解，如果仍然失敗的話，添加一些TFA（10-50微升）來增溶，然后用水稀釋至理想濃度。 3.如果整段肽所帶電荷是陰性的，說明該肽是酸性的。酸性的多肽可以嘗試用PBS（PH 7.4）來溶解，如果不溶的話，添加少量的堿性溶劑，如0.1 M的碳酸氫銨，然后加水稀釋至理想濃度。含有游離半胱氨酸的多肽應(yīng)溶于脫氣的酸性緩沖液中，因?yàn)楫?dāng)PH值大于7時(shí)，巰基會(huì)被迅速氧化成二硫化物。 4.如果整段肽電荷是零，說明肽是中性的。中性肽通常溶于有機(jī)溶劑。首先，嘗試添加少量乙腈、甲醇或異丙醇。對(duì)于高度疏水的多肽，可使用少量的二甲基亞砜溶解，然后用水稀釋至理想濃度。對(duì)于含有自由半胱氨酸的肽，需使用DMF而不是DMSO。對(duì)于有聚集傾向的肽，可添加6M鹽酸胍或8M尿素，然后進(jìn)行必要的稀釋。 為了防止或減少多肽降解，請(qǐng)將多肽以凍干粉形式保存在-20°C，-80°C更佳。如果需要保存溶液肽，最好分成小樣存放，以避免反復(fù)凍融。一份樣品融凍后未用完，應(yīng)扔掉。細(xì)菌降解有時(shí)會(huì)成為溶液肽的麻煩，所以請(qǐng)將肽溶于無菌水或肽溶液過濾除菌。 堿性氨基酸:K,R,H,N-terminus 酸性氨基酸  ,E,C-terminus極性中性氨基酸:F,I,L,M,V,W,Y 非極性疏水氨基酸:G,A,S,T,C,N,Q,P,乙�；�，酰胺基 專業(yè)科研定制多肽 科研級(jí)替爾瑞他現(xiàn)貨 |
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蘇州默迪夫
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2樓2024-08-06 14:04:27
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